Каква е целта на първичното антитяло в Western blot?
Каква е целта на първичното антитяло в Western blot?

Видео: Каква е целта на първичното антитяло в Western blot?

Видео: Каква е целта на първичното антитяло в Western blot?
Видео: Western Blotting Basics.mp4 2024, Юли
Anonim

С метода за директно откриване, ензимно- или флуорофор-конюгиран първично антитяло се използва за откриване на интересуващия антиген върху петно . В метода за непряко откриване, без етикет първично антитяло първо се използва за свързване с антигена.

Освен това, какво е първичното антитяло в Western blot?

The първично антитяло разпознава и свързва епитопа или специфичната аминокиселинна последователност на протеина, който представлява интерес. Втори антитела използвани за Western blotting обикновено са конюгирани с ензим; най -често използваните ензими са пероксидаза от репички (HRP) и алкална фосфатаза (АР).

Освен това, какво прави първичното антитяло? Първичните антитела са имуноглобулини, които се свързват със специфичен антиген ( протеин , пептид, малка молекула и т.н.) представляват интерес и обикновено са неконюгирани. Добро първично антитяло разпознава и се свързва с висок афинитет и специфичност за пречистване, откриване и измерване на антигена.

Следователно, каква е целта на Western blot?

А Western blot е лабораторен метод, използван за откриване на специфични протеинови молекули измежду смес от протеини. След това протеиновите молекули се разделят според техните размери, като се използва метод, наречен гел електрофореза. След разделянето, протеините се прехвърлят от гела върху a попиване мембрана.

Как се използват антителата в Western blotting?

Антитела са използвани за откриване на целеви протеини върху Western blot (имуноблот). The антитела са конюгирани с флуоресцентни или радиоактивни белези или ензими, които дават последваща реакция с нанесен реагент, което води до оцветяване или излъчване на светлина, което позволява откриване.

Препоръчано: